The genome sequence of Treponema pallidum has been completed. Treponema pallidum subspecies pallidum is the causative agent of syphilis and is unculturable under in vitro conditions. This fact severly limits the use of standard genetic approaches to study this organism. We constructed the large insert library of T. pallidum DNA in E. coli harboring 98.7% of all T. pallidum genes on 19 individual clones. We constructed also DNA microarrays containing PCR products of all 1039 predicted T. pallidum ORFs. i) Methods of functional genomics will be used for gene function identifications. ii) Closely related T. paraluicuniculi is the etiologic agent of veneral spirochetosis of rabbits and is not infectious to humans. Genomic comparisons of both treponemes can provide evidence of genetic diversity that can be related to the different pathogenicity of these closely related bacteria. DNA microarray-based technology allows comparisons between these organism on both DNA (genome structure) and mRNA (en)
Genom spirochety Treponema pallidum byl kompletně sekvenován v roce 1998. Treponema pallidum subspecies pallidum je etiologickým agens syfilis. Tuto spirochetu není možné kultivovat v podmínkách in vitro, což znemožnuje použití klasických molekulárně genetických metod pro studium této bakterie. Proto navrhujeme použití metod funkční genomiky a DNA microarrays. Připravili jsme BAC knihovnu T. pallidum v E. coli, která v 19 klonech obsahuje 98.7 % všech genů T. pallidum. Současně jsme připravili DNA microarray čip, který obsahuje PCR produkty všech 1039 predikovaných genů T. pallidum. i) Knihovna T. pallidum bude použita pro zjišťování rozdílů mezi klony testovanými za různých podmínek. Zjištěné rozdíly budou použity pro identifikaci genových funkcí. ii) Příbuzný druh T. paraluiscuniculi, způsobující infekce králíků a nepatogenní pro člověka, bude použit pro mapování genomu na DNA i na mRNA úrovni. Zjištěné rozdíly budou vztaženy k rozdílné virulenci obou spirochet a k patogenezi obou
Treponema pallidum subspecies pallidum is the causative agent of syphilis and is unculturable under in vitro conditions. The genome of Treponema pallidum was studied with the methods of functional and comparative genomics. The large insert library of T. (en)
Treponema pallidum subspecies pallidum je etiologickým agens syfilis. Genom spirochety Treponema pallidum byl studován metodami funkční genomiky, DNA microarrays a genomového sekvencování. BAC knihovna T. pallidum v E. coli, která v 19 klonech obsahuje 9 (cs)