During this project the method of fluorescence recovery after photobleaching aided with confocal microscopy should be established in our laboratory. Subsequently the method will be used in experiments determined to yield data on relative mobilities of fluorescent fusion proteins corresponding to protein components of spliceosome and fluorescently labelled RNA constructs bearing specific sequences, that are essential for spliceosome assembly. Fusion proteins will be introduced as expression vectors introduced, RNA constructs by means of microinjection. (en)
Během tohoto projektu by měla být zprovozněna metoda %22fluorescence recovery after photobleaching%22 (FRAP - obnovení fluorescence po vybělení přesvícením). Následně by tato metoda měla být využita v experimentech zaměřených na získání údajů o relativní mobilitě fluorescenčních fůzních proteinů odpovídajících proteinovým složkám spilceosomu a fluorescentně značených RNA konstruktů nesoucích sekvence nezbytné pro sestavování spliceosomu. Fůzní proteiny budou vneseny v podobě expresních vektorů, RNA budou mikroinjikovány.
Výsledky grantu přispěly k prohloubení poznání o funkční organizaci buněčného jádra. Byly získány nové informace o integraci procesů sestřihu do jaderné architektury a rovněž nové informace o procesech syntézy rRNA a replikace a oprav DNA. (cs)
The results obtained expanded our knowledge on the functional organization of the nucleus. Specifically, new results on the integration of splicing processes, as well as rRNA synthesis (en)