Attributes | Values |
---|
rdf:type
| |
Description
| - 1725 bp long fragment of virus replicase gene ORF 2b was amplified by PCR from PLRV of previously sequenced Oděskij isolate. The amplicon was subcloned into pJET 1.2 blunt plasmid (Fermentas) and used for the construction of expression cassette further containing enhanced CaMV35S promotor and OCS terminator. The binary plasmid with the expression cassette was mobilized into Agrobacterium strain C58. Transgenic plants were prepared from two susceptible varieties Orbit a Red Anna which are also well suited for in vitro regeneration. In total we prepared and tested 8 transgenic lines of Orbit background (Orsvin 1–8) and 3 lines of Red Anna (Rasvin 4, 6, 11). Te resistance was assessed using artificial virus inoculation by grafting in the greenhouse. The plants were inoculated in three different time points of maturity and also the virus load was assayed by ELISA in three different intervals post inoculation. From positive virus titěra it is evident that the tested transgenic lines do not show extreme resistance. Substantial differences in the virus load and its multiplication and translocation between the transgenic lines of both varieties and their non-transgenic controls were observed especially in the sekond inoculation term. Both virus concentration in plant sap and symptom expression was assessed in greenhouse secondary infected plants. Nontransgenic Orbit plants showed significantly higher absorbance levels than all tested transgenic Orsvin lines (with the exception of line 7) in both assessed periods. It can be speculated that the transgenic plants only allowed the virus to multiply to lower levels. Significant differences were also observed in the expression of visual symptoms at the beginning of vegetation. Lower virus load in secondary infected Rasvin plants was apparent particularly in lines 6 and 11, the secondary inoculated transformants of line 11 were visually effectively symptomless. (en)
- Z ORF 2b (gen replikázy) sekvenovaného izolátu PLRV Oděskij byl amplifikován 1 725 bp dlouhý fragment, amplikon byl naklonován do plazmidu pJet1.2 blunt (Fermentas), použit pro konstrukci expresní kazety a mobilizován do agrobacteria C58. Pro přípravu transgenních rostlin byly vybrány odrůdy Orbit a Red Anna s vyšší náchylností k PLRV a schopností regenerace na selekčním a diferenciačním médiu. Bylo připraveno a zkoušeno 8 transgenních linií z odrůdy Orbit (Orsvin 1–8) a 3 linie z odrůdy Red Anna (Rasvin 4, 6, 11). K hodnocení rozdílů v rezistenci byla zvolena metoda umělé inokulace skleníkových rostlin roubováním. Byly zkoušeny tři termíny inokulace a rovněž tři termíny detekce PLRV v poinokulačním období pomocí ELISA. Z pozitivních výsledků testování vyplývá, že v transgenních liniích extrémní rezistence navozena nebyla a zkoušení bylo dále zaměřeno na dílčí komponenty rezistence (rozdíly v rezistenci k infekci, multiplikaci a translokaci viru). Zřetelné rozdíly v multiplikaci a translokaci viru mezi většinou transgenních linií Orsvin i Rasvin a původními odrůdami Orbit a Red Anna byly pozorovány zvláště ve druhém termínu inokulace roubováním. U sekundárně infikovaných rostlin přesadby ve skleníku byla hodnocena koncentrace viru ve šťávě a symptomatická reakce. Původní odrůda Orbit vykazovala významně vyšší hodnoty absorbance v obou termínech zkoušení než všechny linie Orsvin (s výjimkou linie č. 7) a lze tak dovozovat nižší úroveň multiplikace viru v transformovaných liniích. Významné rozdíly byly pozorovány též v expresi vizuálních příznaků na počátku vegetace. Snížení koncentrace viru v sekundárně infikovaných liniích Rasvin bylo patrné zejména u linie 6 a 11, sekundárně infikované transformanty byly z hlediska vizuální reakce prakticky bezpříznakové. Výsledky u obou zkoušených odrůd indikují navození určitého stupně rezistence k PLRV dokumentované u většiny transgenních linií.
- Z ORF 2b (gen replikázy) sekvenovaného izolátu PLRV Oděskij byl amplifikován 1 725 bp dlouhý fragment, amplikon byl naklonován do plazmidu pJet1.2 blunt (Fermentas), použit pro konstrukci expresní kazety a mobilizován do agrobacteria C58. Pro přípravu transgenních rostlin byly vybrány odrůdy Orbit a Red Anna s vyšší náchylností k PLRV a schopností regenerace na selekčním a diferenciačním médiu. Bylo připraveno a zkoušeno 8 transgenních linií z odrůdy Orbit (Orsvin 1–8) a 3 linie z odrůdy Red Anna (Rasvin 4, 6, 11). K hodnocení rozdílů v rezistenci byla zvolena metoda umělé inokulace skleníkových rostlin roubováním. Byly zkoušeny tři termíny inokulace a rovněž tři termíny detekce PLRV v poinokulačním období pomocí ELISA. Z pozitivních výsledků testování vyplývá, že v transgenních liniích extrémní rezistence navozena nebyla a zkoušení bylo dále zaměřeno na dílčí komponenty rezistence (rozdíly v rezistenci k infekci, multiplikaci a translokaci viru). Zřetelné rozdíly v multiplikaci a translokaci viru mezi většinou transgenních linií Orsvin i Rasvin a původními odrůdami Orbit a Red Anna byly pozorovány zvláště ve druhém termínu inokulace roubováním. U sekundárně infikovaných rostlin přesadby ve skleníku byla hodnocena koncentrace viru ve šťávě a symptomatická reakce. Původní odrůda Orbit vykazovala významně vyšší hodnoty absorbance v obou termínech zkoušení než všechny linie Orsvin (s výjimkou linie č. 7) a lze tak dovozovat nižší úroveň multiplikace viru v transformovaných liniích. Významné rozdíly byly pozorovány též v expresi vizuálních příznaků na počátku vegetace. Snížení koncentrace viru v sekundárně infikovaných liniích Rasvin bylo patrné zejména u linie 6 a 11, sekundárně infikované transformanty byly z hlediska vizuální reakce prakticky bezpříznakové. Výsledky u obou zkoušených odrůd indikují navození určitého stupně rezistence k PLRV dokumentované u většiny transgenních linií. (cs)
|
Title
| - A possibility to elucidate transgenic resistance of potatoes for Potato Leafroll Virus (PLRV) (en)
- Možnost navození transgenní rezistence bramboru proti viru svinutky bramboru (PLRV)
- Možnost navození transgenní rezistence bramboru proti viru svinutky bramboru (PLRV) (cs)
|
skos:prefLabel
| - A possibility to elucidate transgenic resistance of potatoes for Potato Leafroll Virus (PLRV) (en)
- Možnost navození transgenní rezistence bramboru proti viru svinutky bramboru (PLRV)
- Možnost navození transgenní rezistence bramboru proti viru svinutky bramboru (PLRV) (cs)
|
skos:notation
| - RIV/60109807:_____/12:#0000201!RIV13-MZE-60109807
|
http://linked.open...avai/predkladatel
| |
http://linked.open...avai/riv/aktivita
| |
http://linked.open...avai/riv/aktivity
| |
http://linked.open...iv/cisloPeriodika
| |
http://linked.open...vai/riv/dodaniDat
| |
http://linked.open...aciTvurceVysledku
| |
http://linked.open.../riv/druhVysledku
| |
http://linked.open...iv/duvernostUdaju
| |
http://linked.open...titaPredkladatele
| |
http://linked.open...dnocenehoVysledku
| |
http://linked.open...ai/riv/idVysledku
| - RIV/60109807:_____/12:#0000201
|
http://linked.open...riv/jazykVysledku
| |
http://linked.open.../riv/klicovaSlova
| - viral replicase, transgenic line, inoculation by grafting, virus translocation and concentration (en)
|
http://linked.open.../riv/klicoveSlovo
| |
http://linked.open...odStatuVydavatele
| |
http://linked.open...ontrolniKodProRIV
| |
http://linked.open...i/riv/nazevZdroje
| |
http://linked.open...in/vavai/riv/obor
| |
http://linked.open...ichTvurcuVysledku
| |
http://linked.open...cetTvurcuVysledku
| |
http://linked.open...vavai/riv/projekt
| |
http://linked.open...UplatneniVysledku
| |
http://linked.open...v/svazekPeriodika
| |
http://linked.open...iv/tvurceVysledku
| - Moravec, Tomáš
- Plchová, Helena
- Čeřovská, Noemi
- Navrátil, Oldřich
- Dědič, Petr
|
issn
| |
number of pages
| |
is http://linked.open...avai/riv/vysledek
of | |