The project aims at development of an ultrasensitive electrochemical immunosensors for detection of specific malignant disease biomarkers. High sensitivity of detection is essential for early diagnosis of malignant diseases. Project is focused on detection of novel highly specific biomarker of ovarian carcinoma, protein HE4, in patient´s urine and serum, and on detection of pepsinogen A and C in serum as biomarkers of gastric carcinoma. Immunosensor technology and specificity of immunochemical reaction will be combined with advantages given by the superparamagnetic particles. Antibody modified magnetic microspheres wil be used for specific capture of target antigen from complex biological material and immunocomplex separated using magnetic field will be labelled by secondary antibody modified with nanoparticles, whose mesoporous surface is charged with HRP enzyme and mediator in order to enhace the detection sensitivity. Miniaturized screen printed three-electrode sensors will be applied for electrochemical detection. (en)
Hlavním cílem projektu je vývoj ultrasensitivních elektrochemických imunosenzorů pro detekci specifických biomarkerů vybraných maligních onemocnění. Vysoká citlivost detekce je nezbytná pro včasnou diagnostiku maligních onemocnění. Zaměříme se na průkaz nového vysoce specifického biomarkeru ovariálního karcinomu, proteinu HE4, v moči a séru a na průkaz biomarkerů karcinomu žaludku, tj. pepsinogenu A a C v séru. Imunosenzory budou kombinovat specificitu imunochemické reakce spolu s výhodami, které poskytují superparamagnetické částice. Protilátkou modifikované magnetické mikročástice specificky zachytí antigen z komplexního biologického materiálu a poté bude magnetickým polem separovaný imunokomplex označen sekundární protilátkou modifikovanou nanočásticemi, jejichž mikroporézní povrch bude pro zvýšení citlivosti nasycen mediátorem a enzymem HRP. Signál bude elektrochemicky měřen pomocí miniaturizovaných tříelektrodových senzorů.
V rámci řešení projektu byly vyvinuty biosenzory pro detekci dvou nádorových markerů. Senzory jsou založeny na kombinaci magnetických částic modifikovaných specifickými protilátkami a elektrochemické detekce sekundární protilátky nesoucí elektroaktivní značku. Výzkumné práce probíhaly v souladu s plánem. Dosažené výsledky naplňují vytýčené cíle. Na základě výsledků bylo publikováno devět prací. (cs)
During the project work were developed biosensors for detection of two tumor markers. These sensors are based on combination of magnetic particles modified by specific antibodies and electrochemical detection of secondary antibody bearing electroactive tag. Research works were in accordance with the project research plan. Acquired results completely meet the objectives. Nine papers were published. (en)