Narušením trávení u klíštěte Ixodes ricinus je možné potlačit přenos spirochét Borrelia burgdorferi, původce Lymské boreliózy. Dosud jsme charakterizovali pět hlavních peptidáz zodpovědných za trávení hostitelské krve. Tyto enzymy mají veliký potenciál jako možné %22skryté%22 antigeny pro racionální vývoj vakcíny. Abychom mohli najít nejvhodnější kandidáty, které by bylo možné zasáhnout v časných fázích sání klíštěte na hostiteli, bude studována dynamika exprese trávicích peptidáz pomocí %22real-time PCR%22 a stanovením jejich aktivit. Úloha jednotlivých peptidáz a jejich vzájemné vztahy v trávicí kaskádě bude určena pomocí funkční proteomiky a dsRNA interference. Schopnost borélií přežít a množit se bude analyzována ve střevě klíšťat s %22vypnutými%22 peptidázami. Výsledně bude testována úspěšnost sání nymf na králicích imunizovaných jednotlivými rekombinantními peptidázami (nebo jejich kombinacemi) s cílem připravit účinnou vakcínu proti klíšťatům.
Interference in the hard tick Ixodes ricinus digestion may control the transmission of the spirochete Borrelia burgdorgferi, the cause of Lyme disease. We have characterized five major peptidases responsible for the digestion of host blood. These enzymes have a great potential as 'concealed' antigens for rational vaccine design. In order to evaluate the candidates to be targeted in the early phase of tick-host interaction, a dynamic expression profile of the peptidases will be determined using qRT-PCR and the activity assay. The roles of individual peptidases as well as their interrelations in the proteolytic cascade will be analyzed by functional proteomics and dsRNA interference. The ability of spirochetes to persist and multiply in these RNAi silenced ticks will be studied. The feeding success of I. ricinus nymphs on rabbits immunized with recombinant peptidases (and their combinations) as antigens will be tested with an ultimate goal to develop an efficient %22anti-tick%22 vaccine. (en)
Byl uceleně popsán multi-enzymatický trávicí aparát u klíštěte Ixodes ricinus, charakterizovány jeho hlavní komponenty, dynamický profil exprese trávicích enzymů v průběhu sání a otestován jejich antigenní potenciál pro vývoj proti-klíštěcích vakcín. (cs)
Multi-enzyme digestive apparatus in the tick Ixodes ricinus was comprehensively described; the major components were characterized including their dynamic expression profile during feeding and their potential for the development of anti-tick vaccines. (en)