The objective of this grant proposal is to clarify and compare the role of probiotic bacteria as modulators of mucosal proliferation and diffrentiation in the intestine of monoassociated and germfree animals. The immunological study will concern membrane markers of intestinal lymphocytes which will be detected using flow cytometry. Cytokone expression will be evaluated by ELISA. A biochemical approach will provide information on intestinal brush border membrane activities, tryptic activity and butyrate production by microflora. Our project will include experimental colitis induced in BALB/c and SCID mice by dextran sulfate treatment. The intestinal inflammation will be influenced by administration of bacteria with probiotic effects in order to diminish severity of colonocyte injury. Immunohistochemical and biochemical approach enables to compare changes in degree of inflammation. Expected results will contribute to our knowledge of inflammatory processes in the intestine. (en)
Cílem našeho grantového projektu je studovat roli probiotických bakterií jako modulátorů proliferace a diferenciace buněk střevní sliznice u monoasociovaných a bezmikrobních zvířat. Změny v expresi membránových znaků střevních lymfocytů (lamina propria, Peyerových plátů, mezenteriálních uzlin) budeme sledovat průtokovou cytometrií, hladiny cytokinů budeme vyhodnocovat metodou ELISA. Stanovíme aktivity enzymů kartáčového lemu enterocytů, tryptickou aktivitu a produkci butyrátu mikroflorou. Dextransulfátem vyvoláme enterokolitidu u imunokompetentních BALB/c a imunodeficitních SCID myší a potom budeme studovat vliv probiotik na střevní zánět s cílem zmírnit poškození mukózy. Imunochemické a biochemické přístupy nám umožní porovnat změny ve stupni zánětu. Předpokládáme, že získané nálezy obohatí naše znalosti o zánětlivých procesech ve střevě.
Zavedli jsme myší model ulcerózní kolitidy a zjistili jsme, že podáváním některých bakterií je možno zánět zmírnit. Zjistili jsme, že u selat monokolonizace E. coli O83 a O86 stimuluje enzymy kartáčového lemu enterocytů a hladinu TNF-alfa v séru. (cs)
We established a mice model of ulcerative colitis and we found that applying of certain bacteria reduce the inflammation. E. coli O83 and O86 stimulated activities of enterocyte brush-border enzyme activities and the level of TNF-alpha in sera. (en)