The introduction of reproductive biotechnologies (e.g. cloning, ICSI) into breeding of large domestic animals has drawn attention to the oocyte activation. The aim of this study is to develop protocol for successful parthenogenetic activation of in vitromatured pig oocytes using nitric oxide (NO) donor. In our previous research we proved for the first time that pig oocytes can be activated through NO-dependent pathway. In this study we plan to improve the efficiency of this NO-activating protocol. In vitro culture of oocytes will be used for this purpose. We will investigate the effects of repeated short-term treatment with NO-donor on the activation of pig oocytes. Activating regimens combining the treatment with NO-donor and protein synthesis inhibitor cycloheximide or protein kinase inhibitor 6-dimethylaminopurine will be used. We will also investigate the role of protein kinase C (PKC) signaling pathway during NO-dependent oocyte activation using activators or inhibitors of PKC. The results (en)
Aktivace oocytů se dostala do centra pozornosti se zaváděním reprodukčních biologií (např. klonování, ICSI) do chovu velkých domácích zvířat. Cílem tohoto projektu je vyvinout aktivační protokol využívající donorů oxidu dusnatého (NO) pro úspěšnou partenogenetickou aktivaci prasečích oocytů zrajících in vitro. V našem předchozím výzkumu jsme poprvé prokázali, že prasečí oocyty mohou být aktivovány prostřednictvím signální dráhy NO. Tento projekt je zaměřený na zvýšení efektivnosti aktivačního protokolu využívajícího NO. K tomuto účelu budou využívány oocyty kultivované in vitro. Bude sledován účinek opakovaného krátkodobého působení donoru NO na aktivaci prasečích oocytů. Dále bude studován aktivační protokol využívající donor NO a inhibitor protesyntézy cykloheximid nebo inhibitor protein kináz 6-dimethylaminopurin. Kromě toho bude sledována úloha signální dráhy protein kinázy C (PKC) v aktivaci oocytů NO pomocí aktivátorů a inhibitorů PKC. Výsledky této studie přinesou nové informace o
The introduction of reproductive biotechnologies (e.g. cloning, ICSI) into breeding of large domestic animals has drawn attention to the oocyte activation. The aim of this study was to develop protocols for successful parthenogenetic activation of in vit (en)
Aktivace savčích oocytů nachází uplatnění v celé řadě biotechnologických postupů. Kromě produkce partenogenetických embryí ji lze využít například pro klonování přenosem jader nebo k produkci partenogenetických embryonálních kmenových buněk. Cílem projek (cs)