In spite of the fact that the methods for the investigation of gene location are available for several years, the structure of interphase nucleus is poorly known and radiation induced changes in the space distribution of interphase chromosomes have been investigated only in several our experiments. Therefore, the main objective of the proposed research in the determination of 2D and 3D distributions of some chromosomes and cancer-related genes in interphase nuclei of several humans cell lines and the investigation of their changes after irradiation by g-rays, neutrons and accelerated heavy ions. The distributions will be determsined using fluorescence in situ hybridization (FISH) technique combined with image acquisition and analysis. The investigationof the structure of interphase nucleus after treatment of cells with cancerogenic agents such as ionizing radiation is urgently needed for the understanding of the mechanisms of cancer induction and consequently for the elaboration of prevention measure (en)
Navzdory tomu, že metody použitelné pro zkoumání polohy genů jsou rozpracovány již několik let, je struktura interfázního jádra prakticky neznáma a radiačně indukované změny této struktury byly zkoumány pouze v několika našich experimentech. Proto bude hlavním cílem navrhovaného projektu zjištění dvojrozměrných a třírozměrných distribucí některých chromosomů a genů, jež mají vztah k nádorovým onemocněním, a to v interfázním jádře několika lidských buněčných linií a stanovení změn těchto distribucí po ozáření gamma zářením, neutrony a urychlenými těžkými ionty. Zmíněné distribuce budou stanovovány použitím fluorescenční in situ hybridizace kombinované se snímáním obrazu a jeho analýzou. Výzkum struktury interfázního jádra v buňkách exponovaných kancerogenním činitelům - jako je např. ionizující záření - je urgentně nutný pro porozumění mechanismů indukce maligních onemocnění a následně pro vypracování preventivních opatření. Základní vybavení naší laboratoře je dostačující pro řešení tohoto projektu; z
Prostředky získané pro řešení projektu umožnily vysoký stupeň inovace přístrojového vybavení laboratoře, s přístupem všem zainteresovaným pracovníkům a dosažení významných výsledků při studiu jemné struktury buněčného jádra. Byly vyvinuty dva plně automa (cs)