Attributes | Values |
---|
rdf:type
| |
rdfs:seeAlso
| |
Description
| - The ability of type I restriction-modification enzyme to translocate DNA preceding restriction makes them to act as an intelligent molecular motor. We have experience with the complex enzyme EcoR124I existing in bacterial cell in equilibrium of R1M2S1and R2M2S1 complexes. Complex with only one HsdR subunit is not able to cleave DNA but retains DNA translocation ability. Therefore, there is an opportunity of studying this enzyme as a molecular motor without problems associated with DNA cleavage.However under certain circumstances even the R1-complex is able to restrict DNA. To eliminate completely this possibility we will focus on site-directed mutagenesis of three conserved amino acid residues in the endonuclease motif of HsdR subunit. We willanalyse the ability of mutant enzyme to translocate DNA across the membrane in vitro using membrane vesicles. The elongation factor Tu, a molecular switch, will be studied as a means of controlling the motor. (en)
- Schopnost restrikčně-modifikačních enzymů translokovat DNA před vlastním štěpením činí z těchto enzymů inteligentní molekulární motor. Máme zkušenosti s komplexním enzymem EcoR124I, který se vyskytuje v bakteriální buňce ve formě dvou komplexů R1M2S1 aR2M2S1, jež jsou ve vzájemné rovnováze. Komplex obsahující jen jednu podjednotku HsdR není schopen štěpit DNA, ale zachovává si schopnost DNA translokovat. Tím se nabízí možnost studovat tento enzym jako molekulární motor bez problémů spojených srestrikcí. Je však známo, že za určitých okolností i R1-komplex může štěpit DNA. Abychom zcela odstranili tuto možnost chceme se zaměřit na řízenou mutagenezi tří konzervovaných aminokyselinových zbytků endonukleasového motivu podjednotky HsdR. Schopnostmutantního enzymu translokovat DNA přes membránu budeme analyzovat in vitro pomocí membranových váčků. Bude studována možnost využití elongačního faktoru Tu jako molekulárního spínače v regulaci molekulárního motoru EcoR124I.
|
Title
| - Uncoupling of DNA restriction and DNA translocation functions of EcoR124I restriction-modification enzyme - a potential melecular motor (en)
- Rozpřažení DNA restrikční a DNA translokační funkce restrikčně-modifikačního enzymu EcoR124I - potenciálního molekulárního motoru
|
skos:notation
| |
http://linked.open...avai/cep/aktivita
| |
http://linked.open...kovaStatniPodpora
| |
http://linked.open...ep/celkoveNaklady
| |
http://linked.open...datumDodatniDoRIV
| |
http://linked.open...i/cep/druhSouteze
| |
http://linked.open...ep/duvernostUdaju
| |
http://linked.open.../cep/fazeProjektu
| |
http://linked.open...ai/cep/hlavniObor
| |
http://linked.open...hodnoceniProjektu
| |
http://linked.open...vai/cep/kategorie
| |
http://linked.open.../cep/klicovaSlova
| |
http://linked.open...ep/partnetrHlavni
| |
http://linked.open...inujicichPrijemcu
| |
http://linked.open...cep/pocetPrijemcu
| |
http://linked.open...ocetSpoluPrijemcu
| |
http://linked.open.../pocetVysledkuRIV
| |
http://linked.open...enychVysledkuVRIV
| |
http://linked.open...okUkonceniPodpory
| |
http://linked.open...okZahajeniPodpory
| |
http://linked.open...iciPoslednihoRoku
| |
http://linked.open...atUdajeProjZameru
| |
http://linked.open.../vavai/cep/soutez
| |
http://linked.open...usZobrazovaneFaze
| |
http://linked.open...ai/cep/typPojektu
| |
http://linked.open.../cep/vedlejsiObor
| |
http://linked.open...jektu+dodavatelem
| - Type I restriction-modification enzymes able to translocate DNA preceding restriction, in process driven by their own ATPase activity, represent an important molecular motors. The HsdR motor subunit has amino-acid sequence motifs typical of the superfami (en)
- Restrikčně modifikační enzymy Typu I schopné translokovat DNA před vlastním štěpením, v procesu poháněném díky jejich vlastní ATPasové aktivitě, představují důležitý molekulární motor. Motorová podjednotka HsdR obsahuje aminokyselinové sekvence charakte (cs)
|
http://linked.open...tniCyklusProjektu
| |
is http://linked.open...vavai/riv/projekt
of | |
is http://linked.open...vavai/cep/projekt
of | |