The aim of the project is to find if oxidized LDL and/or oxidized fibrinogen mediate platelet function in vitro. The modification of proteins by oxidant species generated during activation of platelets will be detected. LDL from normal donors and from iron-overloaded patients will be isolated. Plasma antioxidant status will be estimated by several independent methods. Native LDL and Fbg will be modified by malondialdehyde and by Fenton-like reactions. Influence of patients´s LDL and of both modified LDL and Fbg on platelets will be studied using aggregometry and serotonin release reaction Oxidized proteins in activated platelets will be analyzed by Western blotting. (en)
Cílem projektu je zjistit, zda oxidativně modifikované LDL a fibrinogen mají vliv na funkci lidských krevních destiček in vitro. Budou identifikovány oxidativně modifikované destičkové bílkoviny vzniklé při aktivaci destiček některými agonisty. Izolace %22low density lipoproteins%22 (LDL) zdravých dárců a pacientů přetížených železem. Zároveň bude sledován antioxidační status plazmy několika způsoby. Nativní LDL a fibrinogen (Fbg) budou modifikovány malondialdehydem či reakcemi Fentonova typu. Agregometrií a uvolňovací reakcí serotoninu budou srovnávány účinky LDL pacientů a modifikovaných LDL a Fbg na destičky. V aktivovaných destičkách budou hledány pomocí Western blotu oxidativně modifikované bílkoviny.