Development of novel activity assay for GCPII/GCPIII based on fluorescence anisotropy that, in turn, will be exploited for the identification of novel inhibitor scaffolds targeting GCPII/GCPIII. Identification of novel GCPII/GCPIII inhibitors using in silico and in vitro testing. Structure-based modifications of novel as well as existing GCPII/GCPIII inhibitors to simplify synthesis, improve their pharmacokinetic properties and/or increase liphophilicity and/or affinity. Biochemical and physiological characterization of optimized and newly identified GCPII/GCPIII inhibitors. (en)
Vývoj nového aktivitního stanovení využitelného k identifikaci a optimalizaci inhibitorů GCPII a GCPIII. Optimalizace inhibitorů uvedených enzymů s využitím rentgenostrukturní analýzy.
V rámci projektu byla vyvinuto stanovení pro testování knihoven inhibitorů lidské glutamát karboxypeptidázy II (GCPII). Toto stanovení následně umožnilo otestovat soubor 50,000 nízkomolekulárních sloučennin a z těchto identifikovat nové inhibitory GCPII. V komplementárních přístupech byly nové inhibitory identifikovány a otestovány s využitím in silico metod a rentgenostrukturní analýzou. (cs)
We developed novel assay based on fluorescence polarization used for the high-throughput screening of inhibitors of human glutamate carboxypeptidase II (GCPII). Using the assay we screened a library of 50,000 small molecules and identified novel GCPII-inhibiting compounds. In complementary approaches, we used in silico and structure-assisted methods to identify and evaluate novel GCPII inhibitors. (en)