Description
| - Tato aplikace vyhízí z našich nedávných nálezů, že glykosyl-fofatidylinositol (GPI)- zakotvené membránové glykoproteiny, CEA a Thy-1, v postnukleárních supernatantech z buněk COLO 205 a RBL, lyzovaných v neiontových detergens, tvoří velké nekovalentně vázané komplex s protein-tyrosin kinázami (PTK) p56lek a p53/p56lyn, ale ne s pp60c-src. jAčkoliv GPI-zakotvené glykoproteiny jsou slabě rozpustné v neiontových detergens, nukleární pelety, obsahující většinu těchto proteinů, nebyly doposud studovány. Monoklonální protilátky specifické pro CEA, Thy-1, src-PTK a další budou využity pro určení vnitrobuněčné lokalizace cílových struktur a změn v jejich rozpustnosti anebo aktivitě u buněk po stimulaci povrchových %22receptorů%22. Studována bude rovněž úloha cholesterolu v rozpustnosti GPI-komplexů. Analýzou působení frakcionovaného cytosolu na aktivaci permeabilizovaných buněk budou určeny komponenty cytosolu, které jsou nezbytné pro časná stadia aktivace buněk. Tato studia přispějí k pochopení mechanismu
|