Attributes | Values |
---|
rdf:type
| |
rdfs:seeAlso
| |
Description
| - We will apply 3D imaging by the 4Pi (100 nm 3D resolution) and a novel Biplane FPALM microscopy (30 nm 3D resolution) to advance our knowledge of nucleoids of mitochondrial DNA (mtDNA, clusters of several molecules circular mtDNA and maintenance and executive proteins). Also STED microscopy of immunohistochemical samples (~50 nm 2D resolution) and a conventional confocal time-lapsed microscopy of living model cells will be employed. Mt nucleoids will be visualized by lentivirally transfected conjugates of photoconvertible fluorescent proteins (Eos, Dendra2, PAmCherry, and PA-CFP2) with nucleoid proteins (TFAM, ATAD3, Twinkle helicase, mtSSB, TFBM, mTERF). We will distinct between resting, transcription, and replicative states of mt nucleoids, investigate their redistribution in relation to fission/fusion of mitochondrial network and during cell division, as well as their internal structure, with the regard to mt genetics and selected pathogenic states. The world unique Biplane FPALM microscope built jointly in cooperation with Yale University will be employed to advance the field. (en)
- 3D 100nm/30nm rozlišující 4Pi a BiplaneFPALM mikroskopií, případně 2D STED a časovým konfokálním monitorováním rozlišíme mezi klidovým, transkripčním a replikačním stavem nukleoidů mitochondriální DNA (mtDNA), tedy komplexů několika molekul dvoušroubovicové cirkulární mtDNA a proteinů. Vizualizaci založíme na fluorescenčních a fotokonvertibilních proteinech (Eos, Dendra2, PAmCherry, a PA-CFP2) fúzovaných s proteiny nukleoidů (TFAM, ATAD3, Twinkle helikáza, mtSSB, TFBM, mTERF) případně na imunohistochemii u STED, u vybraných modelových buněk lentivirálně transfekovaných připravenými konstrukty. Prozkoumáme redistribuci mt nukleoidů ve vztahu k dezintegraci a fúzi mitochondriální sítě a buněčnému dělení ve vztahu mezi mateřskou a dceřinou buňkou; a rovněž vnitřní morfologii mt nukleoidů ve vztahu k hybridním strukturám DNA/RNA, výše zmíněným klidovým, transkripčním a replikačním stavům, a vybraným patologickým situacím. Nejméně prostudovaná část buněčné biologie tak bude prozkoumána na světově unikátním zařízení BiplaneFPALM mikroskopu zkonstruovaném ve spolupráci s Yale University.
|
Title
| - Mitochondrial DNA genetics in relation to mitochondrial network dynamics and pathogenesis (en)
- Genetika mitochondriální DNA ve vztahu k dynamice mitochondriální sítě a patogeneze
|
skos:notation
| |
http://linked.open...avai/cep/aktivita
| |
http://linked.open...kovaStatniPodpora
| |
http://linked.open...ep/celkoveNaklady
| |
http://linked.open...datumDodatniDoRIV
| |
http://linked.open...i/cep/druhSouteze
| |
http://linked.open...ep/duvernostUdaju
| |
http://linked.open.../cep/fazeProjektu
| |
http://linked.open...ai/cep/hlavniObor
| |
http://linked.open...vai/cep/kategorie
| |
http://linked.open.../cep/klicovaSlova
| - nucleoids at transcription and replication of mtDNA heteroplasmy mtDNA redistribution upon cell division (en)
|
http://linked.open...ep/partnetrHlavni
| |
http://linked.open...inujicichPrijemcu
| |
http://linked.open...cep/pocetPrijemcu
| |
http://linked.open...ocetSpoluPrijemcu
| |
http://linked.open.../pocetVysledkuRIV
| |
http://linked.open...enychVysledkuVRIV
| |
http://linked.open...lneniVMinulemRoce
| |
http://linked.open.../prideleniPodpory
| |
http://linked.open...iciPoslednihoRoku
| |
http://linked.open...atUdajeProjZameru
| |
http://linked.open.../vavai/cep/soutez
| |
http://linked.open...usZobrazovaneFaze
| |
http://linked.open...ai/cep/typPojektu
| |
http://linked.open...ep/ukonceniReseni
| |
http://linked.open.../cep/vedlejsiObor
| |
http://linked.open...ep/zahajeniReseni
| |
http://linked.open...tniCyklusProjektu
| |
is http://linked.open...vavai/riv/projekt
of | |
is http://linked.open...vavai/cep/projekt
of | |