The introduction of many reproductive biotechnologies (such as cloning) into the breeding of large domestic animals has drawn attention to the meiotic maturation of oocytes and their activation. The aim of this study is to activate in vitro matured pigoocytes through the nitric oxide (NO) and nitric oxide synthase (NOS) dependent pathway and to investigate the role of NO and NOS during the meiotic maturation and activation of pig oocytes. An in vitro culture of pig oocytes will be used for thispurpose. The results of this study will provide new information about the meiotic maturation and activation of pig oocytes. The role of NO and NOS in meiotic maturation of pig oocytes will be investigated through treatment of in vitro maturing pigoocytes with NO-donors, NO-scavengers or NOS-inhibitors. The possibility of activating in vitro matured pig oocytes using NO-donors or using constitutive NOSs in combination with their natural activator, calmodulin will be tested. The parthenogenetic (en)
Meiotické zrání a aktivace oocytů hospodářských zvířat se dostává do popředí zájmu v souvislosti s uplatněním řady reprodukčních biotechnik. Cílem tohoto projektu je aktivace oocytů prasete s využitím signálních cest, zahrnujících oxid dusnatý (NO) asyntázu oxidu dusnatého (NOS) a ověření úlohy NO a NOS v regulaci zrání prasečích oocytů v podmínkách in vitro. Pro potřeby projektu bude využito kultivací oocytů prasete v podmínkách in vitro. Výsledky práce přinesou nové poznatky o regulačníchmechanismech miotického zrání a aktivace savčích oocytů. Úloha NO a NOS při meiotickém zrání oocytů bude ověřena účinky NO-scavengerů, NO donorů či inhibitorů NOS na průběh zrání oocytů v podmínkách in vitro. Bude testována možnost aktivace prasečíchoocytů pomocí molekul uvolňujících NO nebo přímo vnášením NOS do oocytu. Následně bude sledován partenogenetický vývoj takto aktivovaných oocytů. Bude ověřena podíl cGMP-dependentní signální cesty na regulaci aktivace prasečích oocytů pod účinkem NO.
Byla prokázána aktivní účast NO-dependentní signální kaskády na aktivaci savčích oocytů (oocytů prasete). Aktivace této kaskády vyvolává partenogenetickou aktivaci oocytů prasete dozrálých v podmínkách in vitro. Naše práce publikovaná v Mol. Reprod. Dev. (cs)
In our paper published in. Mol. Reprod. Dev., the activation using NO-donors was first described in mammalian oocytes (pig oocytes). However, activation protocols based on the effect of NO-donors had limited effect. Exocytosis of cortical granules was no (en)