Cílem úkolu je využití pluripotentních buněk jako zdroje karyoplastů při produkci klonovaných embryí. Tyto buňky budou těsně po izolaci nebo po určité době kultivace přenášeny do cytoplastů (S-nebo M-fáze). Pomocí elektronové a fluorescenční mikroskopie bude studován stupeň reprogramování přenášených jader jako kritéria možnosti dalšího vývoje. Nejvhodnější kombinace bude pak testována z hlediska vývojového potenciálu. Základní metody, které budou při řešení využity jsou běžně používány na našem pracovišti - techniky kultivace a izolace vybraných typů buněk, mikromanipulační metody, elektronová a fluorescenční mikroskopie. Uplatnění výsledků se předpokládá nejen v zemědělství (využití genetického potenciálu vynikajících zvířat), dále pak v humánní medicíně a farmaceutickém průmyslu, a to zejména v návaznosti na genové manipulace. (cs)
The object of our study is to analyse, by nuclear transplantation, changes in the pluripotent cells fused to enucleated oocytes and thereafter the developmental potential of karyoplast - cytoplast fusion products. The pluripotent cells will be either freshly isolated or cultured in vitro. Cytoplasts used for fusion will be in S-or M-phase. The degree of remodeling will be assessed in clones fixed approximately 16-18 h after fusion according to the morphological changes observed in cloned embryo nuclei. Normality of development (i.c. activation of embryonic genome) will be compared to normal embryos. Cloned embryos will be cultured in vitro or in vivo (oviducts) and the transferable embryos will be transplanted to synchronised recipients. (en)