Cílem projektu je objasnit úlohu oxidativních radikálů v regulaci aktinového cytoskeletu v buněčné odpovědi na stres. V projektu je navrhováno využití kombinace metod fluorescenční mikroskopie živých buněk a imunoelektronové mikroskopie buněk fixovaných za vysokého tlaku k analýze změn distribuce aktinu v kvasince S.cerevisiae. V rámci projektu budou vytvořeny specifické kmeny divokého typu či delečních mutantů (např. yno1 a yhm2) produkující známé aktinové markery (Abp1 a Abp140) fúzované s fluorescenčními proteiny (GFP, mRFP nebo mCherry). Pomocí těchto kmenů bude analyzován vliv teplotního, oxidativního a nutričního stresu na aktinový cytoskelet. (cs)
Aim of the project is to understand the role of ROS in controling F-actin dynamics during cellular stress response. In the project a combined approach based on live cell imaging fluorescence microscopy and immunoelectron microscopy of yeast cells S. cerevisiae is proposed to analyze changes in distribution of filamentous actin. The wild-type and several deletion mutants (e.g. yno1 and yhm2) yeast strains expressing specific actin markers (Abp1, Abp140) fused to fluorescent proteins (GFP, mRFP or mCherry) will be constructed and used to elucidate the effects of heat, oxidative and nutritional stress on F-actin rearrangement. (en)