"The goal of the project is the selection and characterization of recombinant scFv antibodies against LsaA protein of Lawsonia intracellularis. The gene coding LsaA protein will be cloned into the plasmid vector and corresponding protein will be then expressed with a suitable fusion partner enabling its expression in soluble form and efficient purification. Recombinant protein will be purified and used for scFv selection and construction of immunoenzymatic test for Lawsonia intracellularis serological detection. ScFv antibodies will be selected using ""Human Synthetic VH + VL scFv Library"" (Griffin.1 Library). Selected cloneswill be tested for their ability to bind native bacterial LsA protein, sequenced and their affinity constant will be determined.We plan to use these antibodies in immunohistochemical detection of bacteria in tissue sections and for the construction of immunoenzymatic tests." (en)
"Cílem projektu je selekce a charakteristika rekombinantních scFv protilátek proti povrchovému proteinu LsaA bakterieLawsonia intracellularis. Tento cíl bude uskutečněn klonováním části genomu bakterie, kódující povrchový LsaA rekombinantním partnerem umožňujícím jeho solubilní expresi a následnou purifikaci. Získaný protein bude příslušným způsobem purifikován a využit při konstrukci imunoenzymatických testů k diagnostice bakterie. Hlavní aplikací získaného LsaA proteinu bude selekce rekombinantních scFv protilátek. Tyto protilátky budou selektovány z ""Human Synthetic VH + VL scFv Library"" (Griffin.1 Library). Reagující klony budou testovány na schopnost vazby na nativní bakteriální protein a dále budou charakterizovány sekvenováním a stanovením jejich afinitní konstanty. Předpokládáme praktické využití těchto protilátek v imunohistochemickém průkazu bakterie a konstrukci nových typů diagnostických testů." (cs)