Předmětem řešení projektu je vyhodnocení efektivity metodiky separace mrtvých (a případně i ubikvitinovaných) spermií u mužů z neplodných párů pomocí MACS na základě porovnání vyšetřovaných biomarkerů spermií v ejakulátu a následně ve spermiích separovaných technikou MACS. Porovnávány budou tyto markery: ubikvitinace (metodou SUTI); fragmentace DNA (metodou SCSA); úroveň OS (metodou EPR); viabilita (na základě funkčnosti mitochondrií). Budou-li spermie po selekci vykazovat signifikantně lepší parametry než celkový ejakulát, bude dalším krokem zavedení metody separace spermií pomocí MACS do rutinní diagnostiky a léčby andrologického faktoru neplodnosti. (cs)
The aim of project is to evaluate effectivity of sperm separation technique based on negative selection of dead spermatozoa (and eventually subsequent selection of ubiquitinated spermatozoa using MACS technique. This technique will be applied on sperm samples of males from infertile couples. In suspensions of non-separated and separated spermatozoa, chosen biomarkers will be compared: ubiquitination (SUTI assay), DNA fragmentation (SCSA assay), free radicals production (EPR method); sperm viability (based on mitochondrial membrane potential). In the case of significant improvement of chosen biomarkers in sperm samples after separation, this technique could be implemented into routine protocol for sperm preparation for the purpose of assisted reproduction. (en)
Magnetic Activated Cell Sortin; DNA fragmentation; Electron Paramagnetic Resonanc; Ubiquitine; Spermatozoa; Male Infertility; Oxidative stress; Flow-cytometry (en)