"The project proposed involves molecular genetic analysis and ""molecular farming"" of homologues of major plant nuclease I that is involved in many developmental processes in plants. Nuclease I sequences will be cloned from N. benthamiana, A. brassica and H. lupulus plants based on RT PCR and PCR methods to study detailed comparative functional genomics and proteomics of these enzymes. Based on our preliminary results the project aims to verify a possibility to apply nuclease I homologues as efficient antitumorogenic agent similarly to widely analyzed antitumorogenic activity of human and animal RNases. Overexpression and virus-induced gene silencing of nuclease I genes will be studied. The modified plants will be analyzed for phenotypic differences and nucleolytic activities. Bacterial expression vectors will be constructed to produce selected recombinant nuclease I proteins in vitro. In parallel, prepared in planta and in vitro materials will serve as a nuclease I sources in the antiproliferative," (en)
"Navrhovaný projekt zahrnuje molekulárně genetickou analýzu a ""molecular farming"" homologů majoritní rostlinné nukleázy I, která se účastní řady vývojových procesů u rostlin. Sekvence rostlinné nukleázy budou klonovány u druhů N. benthamiana, A. brassicaa H. lupulus na základě přesných RT-PCR a PCR metod s cílem studia detailní srovnávací funkční genomiky a proteomiky těchto enzymů. Na základě našich předběžných experimentálních výsledků, je cílem projektu ověřit možnost využití homologů nukleázy I jako efektivního protinádorového agens, podobně jako jsou pro tyto účely široce studovány RNázy lidského a živočišného původu. Bude sledována overexprese homologů nukleázy I v transgenních rostlinách a suprese nukleázových genů pomocí mechanismu genovéhosilencingu indukovaného viry. Geneticky modifikované rostliny budou analyzovány pro případné fenotypové odchylky a biochemicky na expresi nukleolytických aktivit. Budou připraveny vektorové konstrukty pro expresi nukleázy I v bakteriích pro produkci" (cs)