V navrhovaném projektu bude testována úloha granulózních buněk v inhibici a znovuzahájení meiózy v oocytech savců. Navrhujeme provést experimenty, které umožní podrobně popsat změny v oocytech během jejich společné kultivace s granulózními buňkami. Změny v takto kultivovaných oocytech budou vyhodnoceny pomocí elektronové mikroskopie a v extraktech oocytů bude vyhodnocena aktivita H1 kinázv. Značením (15)S-metioninem budou zjištěny změny proteinového spektra a fosforylace specifických proteinů bude anlyzována po inkorporaci (32)P-ortofosfátu a pomocí Western immunoblottingu s anti-fosfotyrozinovými protilátkami. S použitím imunoelektronové mikroskopie a Western immunoblottingu bude analyzována přítomnost a lokalizace proteinu p34(cdc2) a cyklinu B a . Dále pomocí biochemických přístupů a imunoelektronové mikroskopie budou vyhodnoceny změny v aktivitě MAP kinázy, distribuci mikrotubulů, organizačních center mikrotubulů a kinetochór. (cs)