Thymic B cells (ThBC) will be phenotypized using flow cytometry and localized by immunochemistry. Individual ThBC populations will be thereafter sorted and/or recovered using micromanipulation and their characteristics will be studied in addressing five separate hypotheses: (1) We hypothesize that ThBC may either develop or immigrate into the thymus. (2) Based on preliminary results we hypothesize that at least one population of ThBC develops differently from B cells arising in the bone marrow. (3) It is our hypothesis that different populations of ThBC differ in selection for productive VDJ rearrangement. (4) We also propose to test the hypothesis that B cell lymphogenesis is dependent on surrounding microenvironment. 5. We shall also test the hypothesis that although thymic stromal cells may support development of ThBC, the presence of T cells is required for development of certain ThBC. The proposed project is significatn since it will be the first to characterize ThBC populations. (en)
Fenotyp a distribuce B buněk v thymu budou charakterizovány pomocí průtokové cytometrie a imunohistochemie a thymové B buňky (ThBC) budou dále studovány molekulárně biologickými technikami s ohledem na pět pracovních hypotéz: 1. Předpokládáme, že ThBC se v thymu mohou jak vyvíjet tak i do něj vcestova, 2. S ohledem na předběžně získaná data předpokládáme, že nejméně jedna populace ThBC se vyvíjí odlišným způsobem od B buněk vznikajících v kostní dřeni. 3. Náš předpoklad je, že jednotlivé populace ThBC se odlišují v selekci pro produktivní VDJ přeskupení. 4. Budeme též prověřovat hypotézu, zda B buněčný vývoj závisí na prostředí v kterém k němu dochází. 5. Součástí navrhovaného projektu je též předpoklad, že thymové stromální buňky podporují vznik ThBC podobně jak je tomu v případě kostní dřeně, ale T buňky jsou nezbytné pro vývoj některých ThBC populací. Navrhovaný projekt je významný převážně proto, že je první prací zabývající se bližší charakterizací jednotlivých populací ThBC. (cs)