Předložený projekt si klade za cíle vyvinout vysoce citlivé a selektivní analytické metodiky se zamýšleným použitím pro diagnostické stanovení biologických markerů kyseliny askorbové a dehydroaskorbové a dále neopterinu a jeho derivátů v biologických materiálech. Proto byla jako optimální metoda zvoleno spojení ultra-účinné kapalinové chromatografie (UPLC) s hmotnostní spektrometrií využívající jako analyzátor trojitý kvadrupól. Toto spojení je výhodné svojí vysokou citlivostí a selektivitou a je využíváno právě pro kvantifikaci látek přítomných ve stopových množstvích i ve složitých matricích jako jsou právě biologické materiály. Budou optimalizovány metodiky chromatografické UPLC separace sledovaných látek a dále spojení chromatografie s hmotnostně spektrometrickou detekcí. Dále bude optimalizován izolační postup sledovaných látek z biologických materiálů s cílem získání co nejvyšší recovery a opakovatelnosti procedury. Analytické metodiky budou validovány podle požadavků příslušných (cs)
The aim of proposed project is the development of highly sensitive and selective analytical methods with the intention of use for diagnostic determination of biological markers ascorbic and dehydroascorbic acid and also neopterin and its derivatives in biological matrices. Therefore hyphenation of Ultra Performance Liquid Chromatography (UPLC) and mass spectrometry using triple quadrupole analyzer was chosen as optimal method. This technique is convenient by its high sensitivity and selectivity and thus it is used for quantitation of substances present in trace amounts even at complicated matrices as biological materials. Methods of chromatographic UPLC separation of tested compounds will be optimized together with the conditions of mass spectrometric detection. Isolation procedure of target analytes from biological materials will be optimized thereafter with the aim to get the highest possible recovery and method precision. Developed analytical methods will be validated according to (en)