The objective of this grant proposal is to clarify the role of carbohydrate structures in modulating the biolgical properties of cell-surface glycoproteins of thymocytes and enterocytes. The study will concern highly regulated glycoforms of important membrane markers as recognition determinants during differentiation and development. Many years of our research have shown a key role of glucocorticoid receptors in controlling gene expression of intestinal carbohydrate structures during ontogeny. We propose glucocorticoid hormones to be involved also in both proliferation and apoptosis during thymocyte selection. A combination of immunological and biochemical approaches enables, using monoclonal antibodies and lectins, to compare changes in activities and immunoreactivities of membrane markers on a single cell level, employing double- and triple-colour flow cytometry. Molecular biology approach will provide information on the mode of expression of alpha2,6-sialyltransferase regulating synt (en)
Cílem předkládaného projektu je objasnění úlohy karbohydrátových struktur jako modulátorů biologické aktivity glykoproteinů na buněčném povrchu thymocytů a enterocytů. Studium se týká vysoce regulovaných glykoforem významných rozpoznávacích znaků buněčných membrán a jejich úlohy při diferenciaci a ve vývoji. Náš dlouholetý výzkum prokázal úlohu glukokortikoidních receptorů při kontrole genové exprese interstinálních karbohydrátových struktur v ontogenezi. Předpokládáme, že glukokortikoidní hormonbudou zasahovat též do procesu proliferace i apoptosy v průběhu selekce thymocytů. Imunologický a biochemický přístup umožní při použití monoklonálních protilátek a lektinů a metody dvoubarevné a tříbarevné průtokové cytomerie porovnat změny v aktivitácha imunoreaktivitách membránových znaků na úrovni jedné buňky. Molekulárně-biologický přístup nás bude informovat o způsobu exprese alfa-2, 6-sialyltransferázy, která reguluje syntétu terminálních karbohydrátových struktur membránových glykoproteinů. Před
Jde o velmi přínosný výsledek řešení grantového projektu s dobře dokumentovanými výsledky. Nové poznatky a na mezinárodní úrovni. Výsledky řešitelského kolektivu odpovídají zadání projektu. Výsledky projektu jsou dobrým podkladem pro další zkoumání v hum (cs)