Bude studován vliv kultivačních podmínek a přidaných %22vlastních%22 i %22cizích%22 N-methylovaných aminokyselin na spektrum produkovaných cyklosporinů. Kvalitativní i kvantitativní analýza získaných biosyntetických produktů bude prováděna kombinací HPLC/tandemová hmotnostní spektrometrie. K označení přidaných aminokyselin se použije jednak jejich N-deuteriomethylace, jednak dvojí značení 13C,15N. Bude uskutečněn pokus o identifikaci alternatívních biosyntetických N-methylačních drah. Struktury nových látek budou určeny spektroskopicky po jejich izolaci preparativní HPLC. Vliv N-methylace na výslednou konformaci bude určen srovnáním struktur v pevné fázi a v roztoku získaných rentgenografickými a NMR studiemi. Nové, zajímavé látky budou detailnbiologicky testovány, bude proveden pokus o korelaci struktura vers. aktivita.
The effect of cultivation conditions and added both the %22own%22 and %22foreign%22 N-methylated amino acids on the spectrum of formed cyclosporins will be studied. Qualitative and quantitative analysis of the obtained biosynthetic products will be achieved by HPLC/tandem mass spectrometry techniques. Tagging of supplemented amino acids by their deuteromethylation will be used. Indentification of alternative biosynthetic N-methylation pathways will be attempted. New compounds will be isolated (preparative HPLCand their structures will be elucidated by spectroscopic means. The effect of N-methylation on the adopted conformation will be determined by comparison of solution and solid state structures resulting from NMR and X-ray studies. New isolated compounds will be extensively biologically tested, the correlation between new structures-and activities will be attempted. (en)
Řešitelé pro splnění cíle projektu, jímž bylo studium inkorporace aminokyselin do cyklosporinů vypracovali obdivuhodnou metodiku strukturní analýzy těchto poměrně složitých cyklických peptidů s využitím techniky MS, NMR spektroskopie i rentgenostrukturní (cs)