Recentně popsaný jev RNA interference (RNAi) se přibližuje k praktickému uplatnění u drůbeže a k využití pro výzkum na kuřecím modelu. Chtěli bychom pro tyto účely etablovat replikačně kompetentní retrovirové vektory nesoucí jako kasetu RNAi palindrom pro navození účinné RNAi v kuřecích buňkách in vitro, u kuřecích embryí in ovo a u kuřat in vivo. Tyto vektory budou dále využity pro testování interferenčního potenciálu oligonukleotidů proti jednotlivým genům, např. onkogenu v-src a protoonkogenu c-src. Další aplikací takových vektorů bude reverse buněčné transformace onkogenem v-src in vitro a popř. navození regrese v-src indukovaných sarkomů u kuřat in vivo. Technologie elektroporace malých interferujících RNA do kuřecího embrya in ovo bude použita pro studium vývojových účinků takto posttranskripčně umlčených genů. Potenciál RNAi technologie by rovněž mohl najít uplatnění při pokusech o efektivní transgenesi u drůbeže. Pokusíme se vnášet retrovirové vektory s interferenčními kasetami do (cs)
We plan to use the recently described phenomenon of RNA interference (RNAi) in the chicken model. First, we would like to establish replication-competent retroviral vectors bearing the RNAi hairpin casette for mounting the efficient RNAi in chicken cellsin vitro and in vivo. These vectors will further be used to test the interfering potential of oligonucleotide sequences against discrete genes, e.g. the v-src and c-src. Another application of these vectors will be the reversal of v-src-induced cell transformation in vitro of the regression of v-src-induced sarcomas in vivo. In ovo electroporation technology will be used to deliver chemically synthesized small interfering RNAs into chicken embryos and developmental effects of the RNAi-based gene-knock-down will be followed. Finally, we propose to increase the potential of RNAi technology by the improvement of gene transfer into chicken primordial gonocytes using pseudotyped and pantropized retroviral vectors bearing the RNA hairpin casette. (en)